無血清細胞凍存液是一種特殊的細胞保存液。
1、成分明確:不含動物來源性蛋白和血清,有效減少細菌、病毒和支原體等污染風險。
2、高安全性:由于不含有異源成分,因此具有更高的安全性,適用于體內研究。
3、細胞存活率高:含有DMSO、葡萄糖等細胞營養成分,有助于提高細胞的存活率和活力。
4、適用性廣:通用于各種動物細胞株,包括腫瘤細胞和常規細胞,也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞。
正確使用無血清細胞凍存液的步驟如下:
1、細胞收集與離心:
使用常規方法收集處于對數生長期的細胞。
對于貼壁細胞,使用胰酶或EDTA消化,收集到試管中。
將細胞懸浮液離心,通常條件為1000-2000rpm,4℃,持續3-5分鐘,保留細胞沉淀。
2、加入凍存液與混合:
向細胞沉淀中加入適量的無血清細胞凍存液。
輕柔混合均勻,避免產生氣泡和剪切力,使細胞濃度達到適宜范圍。
3、分裝與凍存:
將混合均勻的細胞懸液分裝到冷凍保存管中。
直接放入-80℃超低溫冰箱中進行冷凍保存,或先-80℃過夜再轉移至液氮罐中。
4、注意事項:
操作過程需在超凈工作臺內無菌進行。
加入細胞后應盡快移至-80℃保存,減少室溫存放時間。
控制好胰酶的消化時間,避免消化過度。
重懸細胞時要輕柔且充分,避免細胞損傷和成團。
遵循上述步驟和注意事項,可以確保無血清細胞凍存液的正確使用,提高細胞凍存效果。